박테리아의 형질 變化(변화) (II)
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작성일 23-07-21 04:58
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9. 다시 같은 양의 DMSO를 가하여 최종 농도가 7%(V/V)이 되도록 하고, 얼음에 10~15분 둔다. 보통 약 3～4시간이 소요되며, 약 2시간 이후부터 30분마다 O.D.를 계속 측정(measurement)해보는 것이 좋다(효율을 증가시키기 위해서 배양된 세균 수가 108 cells/ml를 넘지 않는 것이 좋다). theory(이론)상 E.coli는 최적 조건에서 doubling time이 20분이므로 이에 맞추어 시간을 추정해 볼 수 있으나 배양조건을 고려해야 한다.
5. 배양 부피의 1/3(tube당 15 ml) 되는 frozen storage buffer(FSB)에 세포침전물을 부유 시킨 다음, 두 tube씩 합쳐서 30 ml 씩으로 만든 후 얼음에 10분 놓아둔다. FSB의 成分은 표 1과 같다.
4. 4,500 rpm, 4°C에서 5분간 원심분리한 후 상층액을 제거하고 tube를 뒤집은 상태로 약 1분간 놓아둔다.
u…(skip)6. 위와 같이 다시 원심분리한 후 처음 배양 부피의 1/12.5(tube 당 8 ml)되는 FSB에 부유시키고, 두 tube를 합쳐서 16 ml로 만든다.
1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 ...
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실험방법
실험방법1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 ... , 박테리아의 형질 변화 (II)공학기술레포트 ,
test(실험) 방법
1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 되도록 2 M MgCl2를 30 ml 첨가)에 접종한 후 밤새 키운다.
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박테리아의 형질 變化(변화) (II)
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